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 目的:測定小白花地榆中總皂苷的含量。方法:以地榆皂苷Ⅰ為對照品，采用紫外分光光度法，在波長 323nm 處， 測定總皂苷含量。結(jié)果:小白花地榆中總皂苷含量為6． 44% 。結(jié)論:該方法速度快、重現(xiàn)性好，結(jié)果可靠。 

中藥地榆作為藥用已有2000 多年的歷史，地榆以根入 藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》 ［1］ 。具有涼血止血，解毒斂瘡的功 效。臨床上可用于治療血痢、崩漏、水火燙傷、便血［2］。黑龍 江省野生地榆屬資源主要有地榆( Sanguisorba officinalis L． ) 、小白花地榆( Sanguisorba parviflora ( Maxim． ) Takeda) 、 垂穗粉花地榆( Sanguisorba tenuifolia Fish． ex Link) 等物種。 《中華本草》中記載，地榆屬植物小白花地榆、粉花地榆功效 同藥用地榆，產(chǎn)地替代地榆入藥［3］。地榆主要含有鞣質(zhì)及皂 苷類成分［4］，其所含地榆總皂苷具有單獨或協(xié)同細(xì)胞因子的 促造血細(xì)胞增殖作用［5］。目前，對于小白花地榆的相關(guān)研究 鮮有報道。本實驗對黑龍江省野生小白花地榆的所含地榆 皂苷成分進(jìn)行含量測定，為進(jìn)一步開發(fā)利用黑龍江省野生地 榆屬植物奠定基礎(chǔ)。 方法與結(jié)果 2． 1 測量波長的選擇 精密稱取2mg 已干燥恒重的地榆皂 苷 I 對照品，以濃硫酸定容至50mL，70℃水浴 40 min ，冰 水浴中冷卻至室溫，以濃硫酸為參比液，用紫外分光光度計， 在190 ～400nm 范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，該體系在紫外 323nm 處有 特征吸收峰。確定測定波長為323nm。 2． 2 反應(yīng)溫度與反應(yīng)時間的優(yōu)化 精密稱取2mg 已干燥恒 重的地榆皂苷 I 對照品，以濃硫酸定容至50mL，置于設(shè)定溫 度( 40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90 ℃) 水浴中，定時取樣， 測定323nm 處的吸光度。至吸光度不再升高，即可認(rèn)為反 應(yīng)已達(dá)*。平行試驗 3 次，終結(jié)果顯示在40℃、50℃、 60℃、70℃、80℃、90 ℃條件下，總皂苷*反應(yīng)所需的時間 分別為100、 80、 60、 40、 20、10 min。在反應(yīng)溫度70℃，反應(yīng)時 間40 min 時，OD323nm值大，故確定其為反應(yīng)反應(yīng)溫度 與反應(yīng)時間。
2． 3 總皂苷含量測定 2． 3． 1 對照品溶液配制 精密稱取 5． 02mg 地榆皂苷 I 于 25mL 容量瓶中，加濃硫酸定容至刻度，超聲溶解，置于 70℃ 水浴中加熱 40min 后，冰水浴中冷卻至室溫，即得( 每 1mL 中含0． 2008mg) 。 2．3． 2 供試品溶液的配制 精密稱取250mg 小白花地榆藥 材粉末，加入 25mL 甲醇，超聲提取 30min，將濾液濃縮至干 后，30%的氨試液 15mL 溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加入 15mL 水飽和正丁醇，充分振搖，靜置，分層，重復(fù)正丁醇萃取 操作1 次。合并2 次萃取液于燒瓶中，減壓濃縮至干。殘渣 用適量濃硫酸超聲溶解，并轉(zhuǎn)移到 100mL 容量瓶中，加濃硫 酸定容至刻度，按照2． 2 項下優(yōu)化后反應(yīng)條件進(jìn)行后，冰水 浴中冷卻至室溫，得供試品溶液。 2． 3． 3 方法學(xué)考察 2． 3． 3． 1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密吸取地榆皂苷 I 對照品儲 備液0． 5、1． 0、2． 0、3． 0、4． 0mL 分別置于 5mL 容量瓶中，加 入濃硫酸稀釋定容至刻度，搖勻，備用。分別精密吸取上述，按紫外分光光度法，在 323nm 波長處測定吸光度值，以吸光度( Y，OD323nm) 為縱坐標(biāo)，濃度( X， μg/ mL) 為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行回歸分析，得回歸方 程: Y =0． 048X +0． 2977，r =0． 9980。結(jié)果表明，對照品溶液 在20． 08 ～160． 64μg/ mL 濃度范圍內(nèi)線性良好。 2． 3． 3． 2 精密度試驗 精密吸取對照品儲備液( 0． 0201mg/ mL) 2mL，重復(fù)測定6 次 OD323nm，ＲSD = 0． 68% ( n = 6) 。表 明儀器精密度良好。 2． 3． 3． 3 對照品穩(wěn)定性試驗 取對照品溶液( 0． 0201mg/ mL) 2 mL，放置 0， 1， 2， 4，8 h，測定 OD323nm，測得 ＲSD = 0． 89%，表明對照品溶液在8h 內(nèi)穩(wěn)定。 2． 3． 3． 4 樣品重復(fù)性試驗 取50mg 藥材樣品平行5 份，照 制備供試品溶液方法，測 OD323nm，ＲSD = 1． 43% 。表明該方 法重復(fù)性良好。 2． 3． 3． 5 加樣回收率試驗 精密稱取已測知含量的藥材樣 品，分別精密加入一定量對照品溶液( 0． 0201mg/ mL) ，按照 樣品制備與測定方法，平行做6 組，結(jié)果見表1。

3 討 論 

3． 1 關(guān)于皂苷成分的含量測定方法，文獻(xiàn)中采用較常用的 顯色體系有香草醛 － 冰醋酸 － 高氯酸、甲醇 － 濃硫酸［7］、 香草醛 －硫酸［8］、香草醛 － 高氯酸［9］、高氯酸［10］等，本實驗根據(jù)地榆皂苷具有的糖基能被濃硫酸氧化脫水成糠醛衍生 物性質(zhì)，采用濃硫酸作為顯色試劑，與其他顯色體系相比具 有操作簡便、反應(yīng)靈敏、重現(xiàn)性好的優(yōu)

 目的:測定小白花地榆中總皂苷的含量。方法:以地榆皂苷Ⅰ為對照品，采用紫外分光光度法，在波長 323nm 處， 測定總皂苷含量。結(jié)果:小白花地榆中總皂苷含量為6． 44% 。結(jié)論:該方法速度快、重現(xiàn)性好，結(jié)果可靠。 

中藥地榆作為藥用已有2000 多年的歷史，地榆以根入 藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》 ［1］ 。具有涼血止血，解毒斂瘡的功 效。臨床上可用于治療血痢、崩漏、水火燙傷、便血［2］。黑龍 江省野生地榆屬資源主要有地榆( Sanguisorba officinalis L． ) 、小白花地榆( Sanguisorba parviflora ( Maxim． ) Takeda) 、 垂穗粉花地榆( Sanguisorba tenuifolia Fish． ex Link) 等物種。 《中華本草》中記載，地榆屬植物小白花地榆、粉花地榆功效 同藥用地榆，產(chǎn)地替代地榆入藥［3］。地榆主要含有鞣質(zhì)及皂 苷類成分［4］，其所含地榆總皂苷具有單獨或協(xié)同細(xì)胞因子的 促造血細(xì)胞增殖作用［5］。目前，對于小白花地榆的相關(guān)研究 鮮有報道。本實驗對黑龍江省野生小白花地榆的所含地榆 皂苷成分進(jìn)行含量測定，為進(jìn)一步開發(fā)利用黑龍江省野生地 榆屬植物奠定基礎(chǔ)。  方法與結(jié)果 2． 1 測量波長的選擇 精密稱取2mg 已干燥恒重的地榆皂 苷 I 對照品，以濃硫酸定容至50mL，70℃水浴 40 min ，冰 水浴中冷卻至室溫，以濃硫酸為參比液，用紫外分光光度計， 在190 ～400nm 范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，該體系在紫外 323nm 處有 特征吸收峰。確定測定波長為323nm。 2． 2 反應(yīng)溫度與反應(yīng)時間的優(yōu)化 精密稱取2mg 已干燥恒 重的地榆皂苷 I 對照品，以濃硫酸定容至50mL，置于設(shè)定溫 度( 40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90 ℃) 水浴中，定時取樣， 測定323nm 處的吸光度。至吸光度不再升高，即可認(rèn)為反 應(yīng)已達(dá)*。平行試驗 3 次，終結(jié)果顯示在40℃、50℃、 60℃、70℃、80℃、90 ℃條件下，總皂苷*反應(yīng)所需的時間 分別為100、 80、 60、 40、 20、10 min。在反應(yīng)溫度70℃，反應(yīng)時 間40 min 時，OD323nm值大，故確定其為反應(yīng)反應(yīng)溫度 與反應(yīng)時間。
2． 3 總皂苷含量測定 2． 3． 1 對照品溶液配制 精密稱取 5． 02mg 地榆皂苷 I 于 25mL 容量瓶中，加濃硫酸定容至刻度，超聲溶解，置于 70℃ 水浴中加熱 40min 后，冰水浴中冷卻至室溫，即得( 每 1mL 中含0． 2008mg) 。 2．3． 2 供試品溶液的配制 精密稱取250mg 小白花地榆藥 材粉末，加入 25mL 甲醇，超聲提取 30min，將濾液濃縮至干 后，30%的氨試液 15mL 溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加入 15mL 水飽和正丁醇，充分振搖，靜置，分層，重復(fù)正丁醇萃取 操作1 次。合并2 次萃取液于燒瓶中，減壓濃縮至干。殘渣 用適量濃硫酸超聲溶解，并轉(zhuǎn)移到 100mL 容量瓶中，加濃硫 酸定容至刻度，按照2． 2 項下優(yōu)化后反應(yīng)條件進(jìn)行后，冰水 浴中冷卻至室溫，得供試品溶液。 2． 3． 3 方法學(xué)考察 2． 3． 3． 1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密吸取地榆皂苷 I 對照品儲 備液0． 5、1． 0、2． 0、3． 0、4． 0mL 分別置于 5mL 容量瓶中，加 入濃硫酸稀釋定容至刻度，搖勻，備用。分別精密吸取上述，按紫外分光光度法，在 323nm 波長處測定吸光度值，以吸光度( Y，OD323nm) 為縱坐標(biāo)，濃度( X， μg/ mL) 為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行回歸分析，得回歸方 程: Y =0． 048X +0． 2977，r =0． 9980。結(jié)果表明，對照品溶液 在20． 08 ～160． 64μg/ mL 濃度范圍內(nèi)線性良好。 2． 3． 3． 2 精密度試驗 精密吸取對照品儲備液( 0． 0201mg/ mL) 2mL，重復(fù)測定6 次 OD323nm，ＲSD = 0． 68% ( n = 6) 。表 明儀器精密度良好。 2． 3． 3． 3 對照品穩(wěn)定性試驗 取對照品溶液( 0． 0201mg/ mL) 2 mL，放置 0， 1， 2， 4，8 h，測定 OD323nm，測得 ＲSD = 0． 89%，表明對照品溶液在8h 內(nèi)穩(wěn)定。 2． 3． 3． 4 樣品重復(fù)性試驗 取50mg 藥材樣品平行5 份，照 制備供試品溶液方法，測 OD323nm，ＲSD = 1． 43% 。表明該方 法重復(fù)性良好。 2． 3． 3． 5 加樣回收率試驗 精密稱取已測知含量的藥材樣 品，分別精密加入一定量對照品溶液( 0． 0201mg/ mL) ，按照 樣品制備與測定方法，平行做6 組。

3 討 論 

3． 1 關(guān)于皂苷成分的含量測定方法，文獻(xiàn)中采用較常用的 顯色體系有香草醛 － 冰醋酸 － 高氯酸、甲醇 － 濃硫酸［7］、 香草醛 －硫酸［8］、香草醛 － 高氯酸［9］、高氯酸［10］等，本實驗根據(jù)地榆皂苷具有的糖基能被濃硫酸氧化脫水成糠醛衍生 物性質(zhì)，采用濃硫酸作為顯色試劑，與其他顯色體系相比具 有操作簡便、反應(yīng)靈敏、重現(xiàn)性好的優(yōu)勢。 3． 2 采用紫外分光光度法測定小白花地榆中總皂苷含量， 以濃硫酸為顯色試劑，反應(yīng)條件為反應(yīng)溫度70℃，反應(yīng)時間 40min，該方法簡便、準(zhǔn)確、靈敏、重現(xiàn)性好。 3．3 測定小白花地榆中總皂苷含量可為下一步開發(fā)利用小 白花地榆提供理論依據(jù)。為黑龍江省野生地榆屬資源的開 發(fā)奠定基礎(chǔ)。

勢。 3． 2 采用紫外分光光度法測定小白花地榆中總皂苷含量， 以濃硫酸為顯色試劑，反應(yīng)條件為反應(yīng)溫度70℃，反應(yīng)時間 40min，該方法簡便、準(zhǔn)確、靈敏、重現(xiàn)性好。 3．3 測定小白花地榆中總皂苷含量可為下一步開發(fā)利用小 白花地榆提供理論依據(jù)。為黑龍江省野生地榆屬資源的開 發(fā)奠定基礎(chǔ)。