目的:  建立石淋通分散片中蘆丁的含量測(cè)定方法。方法:  采用紫外分光光度計(jì)法，以蘆丁為對(duì)照，檢測(cè)波長(zhǎng)為 273nm。結(jié)36. 48μg /ml 范圍內(nèi)，吸光度與其濃度呈良好線性關(guān)系 ( r = 0.論:  該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可作為控制本品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)。

1儀器與試藥

島津 UV － 2550 紫外分光光度計(jì); HH － s 恒溫?cái)?shù)顯水浴鍋 ( 江蘇金壇儀器廠) ; 水為超純水; 其余所用試劑均為分析純。蘆丁對(duì)照品 ( 中國藥品生物制品檢定所提供，供 UV 含量測(cè)定用，批號(hào)為 110753 － 200413) ; 石淋通分散片

3 批，批號(hào)為: 110905、110906、110907，由貴港市冠峰制藥有限公司提供。

2方法與結(jié)果

2. 1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱定在 120  干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品 15. 2mg，置 10ml 量瓶中，加 65% 乙醇 5ml，微熱使溶解，放冷，加 65% 乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取 2ml，置 50ml 量瓶中，加 30% 乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得每 1ml 含蘆丁 60. 8μg。
2. 2紫外大吸收波長(zhǎng)及線性范圍考察    精密量取對(duì)照品

溶液 1. 0ml、2. 0ml、3. 0ml、4. 0ml、5. 0ml、6. 0 ml 分別置

10ml 容量瓶中，各加醋酸 － 醋酸鈉緩沖液 ( 取 0. 2mol /L 醋酸鈉溶液 45. 2ml，緩緩攪拌加入 0. 2mol /L 冰醋酸溶液至 pH5. 5，即得) 1ml、0. 1mol /L 三氯化鋁溶液 1ml，搖勻，加 30% 乙醇稀釋至刻度，搖勻，在 200 ～ 400nm 范圍內(nèi)掃描其紫外大吸收波長(zhǎng)，確定為 273nm; 照分光光度法 ( 中國藥典 2010 年版一部附錄Ⅴ) ，以相應(yīng)的試劑為空白，在 273nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程 Y = 0. 035X － 0. 0067，相關(guān)系數(shù) r = 0. 9997。結(jié)果表明: 蘆丁濃度在 6. 08 ～ 36. 48μg /ml 范圍內(nèi)，與吸光度呈良好線性關(guān)系。

2. 3 供試品溶液的制備 取本品 20 片，研細(xì)，混勻，取 0. 2g，精密稱定，置索氏提取器中，加 65% 乙醇加熱回流 4 小時(shí)，提取液濃縮至小體積，轉(zhuǎn)移至 100ml 量瓶中，放冷，加 65% 乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，備用。精密量取續(xù)濾液 0. 8ml，置 10ml 量瓶中，照測(cè)定法項(xiàng)下的方法，自 “加醋酸 － 醋酸鈉緩沖液 ( pH5. 5) 1ml 起，依法測(cè)定吸收度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出供試品中于蘆丁的含量，即得。 2. 5 精密度試驗(yàn) 分別吸取同一供試品溶液 ( 110905) ，連續(xù)測(cè)定 6 次即得。測(cè)得供試品 RSD 為 0. 61% 。

2. 6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào) ( 110905) 樣品，按供試品溶液制備方法制備 6 份，分別進(jìn)樣，測(cè)定，即得。結(jié)果測(cè)得蘆丁為 24. 8mg / 片，RSD = 1. 88% ( n = 6) 。表明該方法重復(fù)性良好。

2. 7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液分別于 0、15、30、60、90、120min 進(jìn)行測(cè)定，即得。結(jié)果供試品中蘆丁含量RSD 為 0. 62% ，表明供試品溶液在 2h 內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.8  加樣回收試驗(yàn)   取已測(cè)知含量 ( 24. 8mg / 片，批號(hào)110905)  的供試品 0. 1g，精密稱定，精密加入 13. 24mg /ml蘆丁對(duì)照品溶液 0. 9ml，按供試液制備項(xiàng)下的方法制備。結(jié)果蘆丁平均回收率為 97. 9% ，RSD 為 1. 10% ( n = 6) ，結(jié)果見表 1。

表1  加樣回收試驗(yàn)測(cè)量結(jié)果 ( n = 6)

樣品中含對(duì)照品加測(cè)得回收平均回收RSD量 ( mg)入量 ( mg)量 ( mg)率 ( % )率 ( % )( % )
                    
11. 631    11. 916    23. 244    97. 4        
11. 494    11. 916    23. 012    96. 5        
11. 838    11. 916    23. 545    98. 2        
11. 712    11. 916    23. 468    98. 7    
11. 563    11. 916    23. 141    97. 1        
11. 666    11. 916    23. 512    99. 4                        

2. 9 樣品測(cè)定 按供試液的制備及檢測(cè)方法，測(cè)定 3 批石淋 通 分 散 片 中 蘆 丁 含 量 ( mg / 片 ) 分 別 為 25. 1、

3討論

采用超聲處理 30min、加熱回流 1h、索氏提取 4h 進(jìn)行提取方法考察，結(jié)果采用索氏提取測(cè)得含量結(jié)果高，故采用索氏提取為提取方法。采用水、65% 乙醇、無水乙醇作提取溶劑進(jìn)行考察，用 65% 乙醇提取所得含量比高，且雜質(zhì)較少，故采用 65% 乙醇作為提取溶劑。以索氏提取2h、4h、6h，進(jìn)行提取時(shí)間考察，索氏提取 4h，測(cè)得含量結(jié)果高，故索氏提取以 4h 為好。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)含量測(cè)定方法合理可行，達(dá)到預(yù)期目的。